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Departamento de Patologia Oral e Maxilo-facial do Instituto de Medicina Dentária SVS Mahabubnagar, Andhra-Pradesh (INDIA).
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Dr. Sanjeevareddigari Shylaja
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Abstrato
Fundo:Os cistos das mandíbulas são provavelmente as lesões ósseas destrutivas mais comuns no esqueleto maxilofacial humano. Os cistos odontogênicos são derivados do epitélio, que está associado ao desenvolvimento do aparelho dentário e pode ser de origem desenvolvimental ou inflamatória. Os cistos odontogênicos mais comuns são cistos radiculares, cistos dentígeros e ceratocistos odontogênicos. Entretanto, os cistos de origem desenvolvimental podem apresentar alterações inflamatórias secundárias à infecção. A degranulação mastocitária desempenha importante papel na resposta inflamatória e especula-se que alterações no número e na distribuição poderiam contribuir para a patogênese dos cistos odontogênicos. Então, uma tentativa foi feita para avaliar a significância e distribuição dos mastócitos no cisto radicular,
Materiais e Métodos: Este estudo retrospectivo foi realizado recuperando os registros e os blocos de parafina de 40 casos confirmados de cistos odontogênicos, dos quais 19 eram cistos radiculares, 12 eram ceratocistos odontogênicos e 9 eram cistos dentígeros.
Seções de 5µm de espessura foram preparadas e coradas com hematoxilina e eosina, bem como com azul de toluidina. Os mastócitos corados com azul de toluidina foram então contados sob um campo microscópico de alta potência (40X) para cada espécime em três zonas diferentes e o valor médio obtido. O número médio de mastócitos foi então comparado entre diferentes zonas usando o teste de Desvio Relativo 'Z'.
Resultados:Nos casos de cisto radicular, o maior número médio de mastócitos por campo de alta potência foi observado na faixa etária de 10-19 anos. Uma diferença estatisticamente significativa (p <0,05) entre a distribuição dos mastócitos foi observada entre as zonas subepiteliais e profundas. Nos casos de ceratocisto odontogênico, o maior número médio de mastócitos por campo de alta potência foi observado na faixa etária de 20 a 29 anos. Uma diferença estatisticamente significativa (p <0,01) entre a distribuição dos mastócitos foi observada entre as zonas subepiteliais e profundas, bem como entre as zonas subepiteliais e intermediárias. Nos casos de cisto dentígero, o maior número médio de mastócitos por campo de alta potência foi observado na faixa etária de 10 a 19 anos. Uma diferença estatisticamente significativa (p <0.
Conclusão: No presente estudo, o número máximo de mastócitos foi observado na zona subepitelial em comparação com outras zonas. O número de mastócitos diminuiu com a idade e não houve predileção por gênero. No entanto, estudos posteriores utilizando técnicas imuno-histoquímicas podem ajudar na melhor compreensão da patogênese desses cistos.
Palavras-chave
Mastócitos, cistos odontogênicos, cisto radicular, ceratocistos odontogênicos, cisto dentígero, azul de toluidina.
Como citar este artigo:
SHYLAJA S. MASTÓCITOS EM CISTOS ODONTOGÊNICOS. Jornal de Pesquisa Clínica e Diagnóstica [serial on-line] 2010 abril [citado: 2018 31 de agosto]; 4: 2226-2236. Disponível em
http://www.jcdr.net/back_issues.asp?issn=0973-709x&year=2010&month=April&volume=4&issue=2&page=2226-2236&id=674
Introdução
Os cistos das mandíbulas são provavelmente as lesões ósseas destrutivas mais comuns no esqueleto maxilofacial humano. A região da cabeça e pescoço e a mandíbula em particular, compreendem coletivamente um dos locais mais comuns para a ocorrência de cistos (1) .
Os cistos odontogênicos são derivados do epitélio que está associado ao desenvolvimento do aparelho dentário. Eles são de origem desenvolvimental ou podem resultar de inflamação. Os cistos odontogênicos mais comuns são cistos radiculares, ceratocistos odontogênicos e cistos dentígeros (2) .
A expansão cística é influenciada por vários fatores, como crescimento mural, aumento hidrostático e fator de reabsorção óssea. A pressão hidrostática do fluido luminal é importante no aumento do cisto e a atividade dos mastócitos pode contribuir para isso aumentando a pressão osmótica do fluido (3) .
Os mastócitos têm sido objeto de investigação há quase um século, mas ainda permanecem um enigma em termos de sua função in situ. Eles muitas vezes intrigam os investigadores desde a primeira vez em que foram identificados e foram nomeados por Ehrlich em 1887 (4) .
Os mastócitos estão presentes em ambientes mucosos e de tecido conjuntivo. Eles possuem grânulos citoplasmáticos que mancham meta-cromaticamente sob condições comuns (5). Degranulações de mastócitos desempenham um papel importante no início da resposta inflamatória. Essa ação é significativa na patogênese de diferentes lesões como líquen plano, doença periodontal precoce, colite ulcerativa, fibrose pulmonar, intestino inflamatório, mastocitose sistêmica e cistos odontogênicos (6) .
Os mastócitos são reconhecidos em cistos odontogênicos não queratinizantes e queratinizantes. Alterações no seu número e distribuição podem contribuir para a patogênese dos cistos odontogênicos (3) . Os corantes especiais usados para a coloração de mastócitos são azul de toluidina, azur A, castanho bismark, tionina e azul de alcian (7) .
Os mastócitos podem desempenhar um papel na patogênese dos cistos odontogênicos. Assim, procurou-se avaliar a significância e distribuição dos mastócitos em cistos radiculares, ceratocistos odontogênicos e cistos dentígeros, utilizando coloração com azul de toluidina.
Objetivos e Objetivos
Estudar a presença e o número de mastócitos em cistos radiculares, ceratocistos odontogênicos e cistos dentígeros. Avaliar a distribuição de mastócitos nas zonas subepitelial, intermediária e profunda. Correlacionar o número de mastócitos e sua distribuição com a idade, sexo e as diferentes zonas consideradas.
Material e métodos
Este estudo retrospectivo foi realizado recuperando os registros e os blocos de parafina de casos confirmados de cistos odontogênicos. Os blocos de parafina foram seccionados e corados com hematoxilina e eosina e azul de toluidina. Um total de 40 casos foram incluídos neste estudo, dos quais 19 eram cistos radiculares, 12 eram ceratocistos odontogênicos e 9 eram cistos dentígeros.
A contagem de mastócitos foi feita em secções que foram coradas com azul de toluidina. Quatro áreas foram selecionadas aleatoriamente sob um campo de alta potência (40x) para cada amostra. A área abrangida por um campo de alta potência (HPF) foi tomada como um campo microscópico (MF). Em cada área, três zonas foram consideradas. A zona subepitelial era a área logo abaixo do epitélio e os próximos dois campos microscópicos consecutivos eram as zonas intermediárias e profundas.
Análise estatística
O número de mastócitos por campo microscópico para cisto individual foi calculado nas três zonas e as médias (± DP) para cada tipo de cisto foram tomadas. O número médio de mastócitos foi comparado entre as diferentes zonas usando o teste de Desvio Relativo 'Z'.
Resultados
Resultados e Observações
Do total de 40 casos, 30 eram do sexo masculino e 10 do sexo feminino.
Idade
Nos cistos radiculares, a idade variou de 7 a 48 anos. O número máximo de casos foi na faixa etária de 10 a 19 anos (8 casos). Nos ceratocistos odontogênicos, a idade variou de 15 a 58 anos. O número máximo de casos foi na faixa etária de 20 a 29 anos (10 casos). Nos cistos dentígeros, a idade variou de 11 a 45 anos. O número máximo de casos foi na faixa etária de 10 a 19 anos (4 casos) (Tabela / Fig. 1) .
Sexo
Dos 19 casos de cistos radiculares, 12 (63,2%) eram do sexo masculino e 7 (36,8%) do sexo feminino, com relação homem-mulher de 1,7: 1. Dos 12 casos de ceratocistos odontogênicos, 10 (83,3%) eram do sexo masculino e 2 (16,7%) do sexo feminino, com relação homem-mulher de 5: 1. Dos 9 casos de cistos dentígeros, 8 (88,9%) eram do sexo masculino e 1 (11,1%) do sexo feminino, com relação homem-mulher de 8: 1 (Tabela / Fig. 1) . Distribuição de Mastócitos Idade
Distribuição
Sábia de Células do
Mastc Em cistos radiculares, o número médio de mastócitos por HPP foi alto na faixa etária de 10 a 19 anos [Tabela / Fig 2] (Tabela 2). Nos ceratocistos odontogênicos, o número médio de mastócitos por HPF foi elevado na faixa etária de 20 a 29 anos (Tabela / Fig. 2).(Tabela 3). Nos cistos dentígeros, o número médio de mastócitos por HPF foi elevado na faixa etária de 10 a 19 anos [Tabela / Fig. 2] (Tabela 4).
Distribuição Sexual dos Mastócitos
Em todos os três cistos, diferenças estatisticamente significantes não foram notadas na distribuição dos mastócitos entre machos e fêmeas (Tabela / Fig 3) (Tabela 5), (Tabela 6), (Tabela 7).
Distribuição de células mastro na zona sábia
Em cistos radiculares, o número médio de mastócitos por HPF foi alto na zona subepitelial em comparação com as zonas intermediárias e profundas. Uma diferença estatisticamente significativa (P <0,05) foi observada entre as zonas subepitelial e intermediária (Tabela / Fig. 4) (Tabela 8).
Em ceratocistos odontogênicos, o número médio de mastócitos por HPF foi alto na zona subepitelial em comparação com as zonas intermediárias e profundas. Uma diferença estatisticamente significativa (P <0,01) foi observada entre as zonas subepitelial e intermediária e entre as zonas subepitelial e profunda (Tabela / Fig. 4) (Tabela 9).
Nos cistos dentígeros, o número médio de mastócitos por HPF foi alto na zona subepitelial em comparação com as zonas intermediárias e profundas. Uma diferença estatisticamente significativa (P <0,05) foi observada entre as zonas subepitelial e profunda (Tabela / Fig. 4) (Tabela 10).
Comparação de mastócitos entre cistos odontogênicos
Diferenças estatisticamente significantes não foram notadas na distribuição dos mastócitos entre os cistos quando as zonas são comparadas (Tabela / Fig 4) (Tabela 11), (Tabela / Fig 5) (Fig 12), (Fig 13), (Fig 14) , (Fig. 15), (Fig. 16), (Fig. 17).
Discussão
Os mastócitos são os membros normais da população celular no tecido conjuntivo fibrilar. Por três quartos de século, os mastócitos eram curiosidades biológicas. Poucas pessoas sabiam alguma coisa sobre elas, seus conteúdos e funções, embora ocasionalmente, poucos investigadores fizessem alguns estudos sem resultados conclusivos. Nos últimos anos, os mastócitos têm recebido atenção crescente e uma série de investigações e revisões têm aparecido na literatura. Com o advento de novas técnicas, várias tentativas foram feitas para estudar a resposta dessas células em condições fisiológicas e patológicas diferentes (8) .
Os mastócitos nas secções coradas com a Mão E exibiram grânulos basofílicos predominantemente abundantes e com azul de toluidina, os mastócitos coraram vermelho-púrpura (coloração metacromática) e o resto da secção corou de azul. Os mastócitos podem ser confundidos com basófilos. As características funcionais e bioquímicas de ambas as células são muito idênticas. Uma distinção entre mastócitos e basófilos pode ser feita na morfologia, na história natural e na expressão de estruturas da superfície celular. Outras células que foram confundidas com mastócitos incluem eosinófilos imaturos ou melanócitos eosinofílicos e macrófagos (14) .
Os mastócitos podem desempenhar um papel na patogênese dos cistos odontogênicos (9). Eles contribuem para cisto alargamento através do aumento da pressão osmótica do fluido, pelo menos, de três maneiras 1) por libertação directa de heparina para o fluido luminal, 2) por libertação de enzimas hidrolíticas que poderiam degradar capsulares componentes da matriz extracelular, facilitando assim a sua passagem para dentro o líquido e pela ação da histamina na contração do músculo liso e na permeabilidade vascular, favorecendo a transudação das proteínas séricas (10) . A degranulação de mastócitos tem sido implicada na geração de prostaglandinas, o que promoveria a reabsorção e remodelação óssea para acomodar o cisto em crescimento (11).. Devido à sua possível importância na patogênese dos cistos odontogênicos, procurou-se avaliar a presença e distribuição de mastócitos no tecido conjuntivo e correlacionar esses dados com a idade, o sexo e as diferentes zonas consideradas.
Quando os grupos etários foram comparados em todos os três cistos, o número médio de mastócitos por HPF mostrou diminuição progressiva com a idade.
Embora não existam estudos que mencionem a correlação entre a contagem de mastócitos e a idade em cistos odontogênicos, em geral, observou-se que a contagem de mastócitos diminui no tecido conjuntivo com a idade, como observado por alguns autores. Matsson L (1993) (12) e Sjolin KE (1946) (13)mostrou que, no homem, houve uma diminuição no número de mastócitos dérmicos com o aumento da idade desde a infância até os adultos. Wolf JE et al. (1973) (14)observaram uma diminuição no número de mastócitos com a idade em ratos sem germes no tecido conjuntivo da mucosa alveolar mandibular e da medula óssea. Esse decréscimo no número de mastócitos com a idade pode ser devido ao aumento da degranulação, que é observado na idade avançada (14) . Abdel et al. (1976) (15) relataram um aumento nos mastócitos dérmicos humanos de 5 a 15 anos de idade, seguido de uma diminuição gradual.
Matsson L. (1993) (12)notaram uma diminuição no número de mastócitos de ratos juvenis para adultos na língua, mucosa bucal e mucosa gengival. O elevado número de mastócitos em vários sítios orais de ratos juvenis sugere que a mucosa bucal de animais em crescimento tem uma maior prontidão para a reação, onde os mastócitos assumem um papel ativo em relação aos adultos.
É uma conjectura pura, se o reduzido número de mastócitos com o aumento da idade em todos os três cistos odontogênicos é resultado do processo normal de envelhecimento ou se está relacionado à patogênese desses cistos. Assim, mais estudos devem ser realizados para saber se está relacionado à idade ou se alguns outros fatores são responsáveis. A contagem de mastócitos varia entre as espécies. Portanto, estudos de possível variação de idade na população de mastócitos na mucosa oral do homem são necessários.
No presente estudo, não houve diferença estatisticamente significativa na contagem de mastócitos entre os sexos em todos os três cistos odontogênicos. Coleman EJ (1974) (16) não observou diferença estatística na contagem de mastócitos entre machos e fêmeas na gengiva do hamster.
No presente estudo, o número de mastócitos foi maior na zona subepitelial do que nas zonas intermediárias e profundas em todos os três cistos odontogênicos. A diferença na distribuição dos mastócitos entre as zonas subepitelial e profunda foi estatisticamente significativa (P <0,05) em todos os três cistos odontogênicos. Nos ceratocistos odontogênicos, observou-se diferença estatisticamente significante (P <0,01) nas zonas subepitelial e intermediária. Isso é compatível com os relatos de Smith G. et al. (1989) (9), que também notaram diferença estatisticamente significante (P <0,05) entre as zonas subepiteliais e profundas de todos os três cistos odontogênicos e também entre os subepiteliais. e as zonas intermediárias no caso de ceratocistos odontogênicos.
A coleção subepitelial de mastócitos em cistos odontogênicos pode ser atribuída ao estímulo quimiotático aos mastócitos, atraindo-os para o revestimento epitelial ou para o conteúdo líquido luminal. A natureza desse estímulo não é clara, mas as proteínas da matriz secretora do epitélio odontogênico normal têm sido relatadas como quimiotáticas para mastócitos. Embora não se saiba que os cistos odontogênicos secretam proteínas da matriz do esmalte, o revestimento epitelial se mancha positivamente para as queratinas e mostrou compartilhar determinantes antigênicos comuns com as proteínas da matriz do esmalte (9) .
Smith G. et al. (1988) (3), em seus estudos histoquímicos sobre glicosaminoglicanos de cistos odontogênicos, observaram uma banda subepitelial de coloração de azul de alcian e isso pareceu ser devido à presença de heparina, que poderia ter sido liberada pela degranulação de mastócitos abaixo do epitélio para produzir esse padrão de coloração .
No presente estudo, não foi observada diferença estatisticamente significante entre outras zonas, como as subepiteliais e intermediárias, e entre as intermediárias e as profundas, com exceção dos ceratocistos odontogênicos, que apresentaram diferença estatisticamente significante (P <0,01) entre os subepiteliais. e as zonas intermediárias. Isto está em contraste com os relatórios de Smith G. et al. (1989) (9)que observou uma diferença significativa (P <0,05) entre as zonas acima mencionadas.
Smith G. et al. (1989) (9) também notaram diferença estatisticamente significante (P <0,03) nas zonas subepiteliais de cistos radiculares e ceratocistos odontogênicos, o que não foi observado no presente estudo.
Estas diferenças podem ser atribuídas à especificidade da coloração avidian-peroxidase em comparação com a coloração com azul de toluidina. Eles descobriram que a mancha de avidina peroxidase era específica para mastócitos e a diferenciação dos mastócitos de outros elementos do tecido era boa, porque não havia coloração em outras células do infiltrado inflamatório ou da matriz extracelular conjuntiva. O azul de toluidina não foi encontrado para ser eficaz devido à má metacromasia, provavelmente decorrente da descalcificação ácida do tecido.
Várias razões podem explicar a dificuldade de comparar os dados de diferentes estudos, como tamanho da amostra, tipo de tecido examinado, método de fixação, tipo de coloração utilizada, critérios morfológicos dos mastócitos considerados pelo investigador, método usado para contagem das células, o número de células examinadas por biópsia, ou talvez a área de tecido investigada era muito pequena para reduzir o possível erro causado pela não homogeneidade da distribuição celular (17) , (18) .
Schwartz J. e Dibble M. (1975) (19) e Teronen O. et al. (1996) (20)observaram que o azul de toluidina, a coloração especial rotineiramente usada para mastócitos, não mancha os mastócitos degranulados (células fantasmas). Isso pode levar a variações no número de mastócitos observados nas diferentes zonas.
Os mastócitos desgranulados podem ser detectados por coloração imuno-histoquímica, utilizando anticorpos monoclonais anti-triptase humana e Western blotting, utilizando anti-soro contra triptase específico de mastócitos (20) .
Teronen O (1996) (20) observou que a densidade de mastócitos intactos diminuiu para fora da luz do cisto. Os mastócitos degranulados eram mais altos na periferia dos cistos, na borda com os ossos, indicando maior atividade dos mastócitos nessa área. Isto foi observado utilizando coloração imuno-histoquímica da triptase dos mastócitos.
Bischoff SCet al. (1996) (17) observaram uma diferença no número de mastócitos em seções coradas com azul de toluidina e pela coloração imuno-histoquímica de mastócitos usando anticorpos monoclonais contra as proteases de mastócitos humanos, triptase e quimase. Eles encontraram um número reduzido de mastócitos em seções coradas com azul de toulidina. A razão óbvia para essa discrepância é que apenas alguns dos mastócitos ativados são detectáveis em seções coradas com azul de toluidina. Os mastócitos degranulados e de repouso máximos podem ser corados imunohistoquimicamente.
Joseph S. et al. (2003)em seu estudo, comparando o azul de toluidina e a tionina, observou-se que o azul de toluidina apresentava mastócitos mais intactos em comparação com a tionina. Por isso, o fixador azul de toluidina de Carnoy é um melhor corante em comparação à tionina (21) .
Antes que qualquer conclusão definitiva possa ser alcançada, pesquisas adicionais devem ser conduzidas em níveis histoquímicos. Tal pesquisa deve fazer uso de técnicas específicas de marcação histoquímica para que os produtos de grânulos expelidos possam ser identificados no tecido conjuntivo e de modo que a diminuição na contagem de mastócitos possa estar correlacionada com o aumento da concentração dos produtos de desgranulação.
Padronização dos métodos convencionais, exigência estrita para identificação de mastócitos, coloração imuno-histoquímica de mastócitos utilizando anticorpos contra proteases granulares e Western blotting com triptase de mastócitos anti-humanos específicos em amostras de extrato de cisto de mandíbula podem lançar mais luz sobre o papel dos mastócitos em a patogênese dos cistos.
Os mastitos desempenham um papel contributivo na patogese dos cistos odontogicos que s frequentemente tratados por enucleao cirgica. Em casos extremos em que a intervenção cirúrgica não é possível, pode-se especular o papel dos inibidores de mastócitos ou da triptase de mastócitos. No futuro, estudos que examinem a influência dos antagonistas de mastócitos na patogênese do cisto podem desvendar completamente o papel dos mastócitos.
Conclusão
No presente estudo, observou-se maior número de mastócitos na zona subepitelial em comparação com as zonas intermediárias e profundas. O número de mastócitos diminuiu com a idade. Não houve dependência de gênero na contagem de mastócitos.
Estudos posteriores utilizando técnicas imuno-histoquímicas de mastócitos e a influência dos antagonistas de mastócitos na patogênese do cisto podem ajudar a desvendar o papel dos mastócitos na patogênese dos cistos odontogênicos.
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